Rakuliini ja rakupanga identifitseerimine
Rakuliini ja rakupanga tuvastamine on regulatiivne nõue. Antikeharavimites, valguravimites ja rakuteraapiatoodetes kasutatavad rakuliinid ja rakupangad peavad tagama nende kvaliteedi, puhtuse ja ohutuse. Õige rakuliini ja rakupanga tuvastamine on biofarmatseutiliste preparaatide tootmisel ülioluline.
Meetodid rakuliini ja rakupanga tuvastamiseks
Rakuliini ja rakupanga tuvastamine on suunatud peamiselt põhirakupankadele (MCB) ja töötavatele rakupankadele (WCB). Lisaks läbivad uurimisrakupangad (RCB) tavaliselt mükobakterite ja steriilsuse kontrolli, enne kui need lülitatakse MCB tootmiseks GMP rajatistesse. Tootjad võivad nõuda ka spetsiifilist viirustesti.
Kehtivate regulatsioonide (nt ICH Q5A/Q5B/Q5D) kohaselt hõlmab rakuliini ja rakupanga tuvastamine peamiselt järgmisi aspekte: rakkude identifitseerimine, steriilsuse testimine, mükoplasma testimine, endogeense ja eksogeense viirussaaste määramine ning tuumorigeensuse testimine. Allpool on kirjeldatud HyQure Biotechi pakutavaid testimiselemente ja meetodeid:
|
Üksuste testimine |
Tuvastamismeetodid |
|
|
Rakkude tuvastamine |
Isosüümid, CO1, STR-d, liikide identifitseerimine |
|
|
Bakterite ja seente uuring |
Membraanfiltreerimine, otsenakatamine ja hingamissignaali meetod |
|
|
Mükoplasma test |
Otsekultuuri meetod, indikaatorrakukultuuri meetod, qPCR meetod (mükoplasma ja spiroplasma testimiseks) |
|
|
Mycobacterium test |
Kultiveerimismeetod, qPCR meetod |
|
|
Eksogeensete ja endogeensete viirusagentide testimine |
Rakkude morfoloogia vaatlus ja vere adsorptsioon |
Rakukultuuri morfoloogia vaatlus ja vere adsorptsiooni test |
|
Erinevate indikaatorrakkude in vitro külvamine |
Tsütopaatilise toime uurimine |
|
|
Loomade ja kanade embrüoneeritud munade in vivo nakatamine |
Kanade embrüoneeritud munad, imetavad ja täiskasvanud hiired jne. |
|
|
Retroviiruse test |
Nakkuskatse, elektronmikroskoopia, pöördtranskriptaasi aktiivsus (TEM-PERT) |
|
|
Liigi{0}}spetsiifiline viirustest |
Hiire-tuletatud, inimesest-tuletatud, ahvist-tuletatud |
|
|
Veiste viiruse testimine |
Tsütopaatilise toime uuring, qPCR meetod |
|
|
Sigade viiruse testimine |
Tsütopaatilise toime uuring, qPCR meetod |
|
|
Muud spetsiifilised viirustestid |
Hiire parvoviiruse test jne. |
|
|
Tumorogeensuse uuring |
Loomkatsed |
|